如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。湖州去外泌体胎牛血清供应商
如何解冻血清?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗?血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。湖州去外泌体胎牛血清供应商胎牛血清支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)大增殖浓度≥2.5×106 个/ml。
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量,补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长必需的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及类物质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很较广。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。相对于新生动物血清或成体动物血清来说,胚胎期动物血清有什么优点?与其它类型血清相比,胚胎期动物血清含有更多的生长因子,及较少的gamma球蛋白含量。血清与血浆的区别:血清是由血液凝固后的上清液制备的;而血浆中含有抗凝剂,所以血浆中含有血液凝固相关的蛋白。血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。血清应保存在-5℃至-20℃,然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。湖州去外泌体胎牛血清供应商
胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。湖州去外泌体胎牛血清供应商
合格的胎牛血清都需要经过严格的多重质检和验证,这里需要特别关注胎牛血清的相关质量合格证明,不但不能含有有害微生物,如细菌、菌类、支原体、病毒等,同时也必须通过了各种性能测试实验。通过验证细胞的形态、增殖速度、克隆形成率等多项测试,性能表现优异的胎牛血清对细胞培养更友好,效果更明显。胎牛血清作为畜牧业的副产品,产量十分有限,且受到天然环境、食物卫生、经济条件及等各种因素的影响,很好的胎牛血清就更加稀有。因此,找到稳定提供同批次胎牛血清的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,还能大量节省试错(经济)成本。湖州去外泌体胎牛血清供应商
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